Amidase (AMD)
Anzima:Ireo dia katalista biolojika makromolekiola, ny ankamaroan'ny anzima dia proteinina
Amidase:Manao katalyzy ny hidirôlizasionan'ny amide aliphatic sy aromatic endogenous sy vahiny isan-karazany amin'ny alàlan'ny famindrana vondrona acyl amin'ny rano miaraka amin'ny famokarana asidra afaka sy amoniaka. Ny asidra hydroxamic sy ny asidra organika hafa dia ampiasaina betsaka ho fanafody satria singa ao amin'ny singa fitomboana, antibiotika ary mpanakana ny fivontosana. Ny amidase dia azo zaraina ho acylases karazana R sy S araka ny stereoselectivity catalyst.
Ankoatra ny fampiroboroboana ny hidirôlizan'ny amides, ny amidase dia afaka fampiroboroboana ny fihetsiky ny famindrana acyl eo anatrehan'ny co-substrates toy ny hydroxylamine.
Samy hafa ny toetran'ny substrate-n'ny amidase avy amin'ny loharano samihafa, ny sasany amin'izy ireo dia afaka manadio ny amida aromatika ihany, ny sasany amin'izy ireo dia afaka manadio ny amida aliphatic ihany, ary ny sasany dia manadio ny α-na ω-amino amida. Ny ankamaroan'ny amine dia manana asa catalytic tsara ho an'ny amida aromatika acyclic na tsotra ihany, fa ho an'ny aromatika sarotra kosa, ny amida heterocyclic, indrindra fa ny amida misy ortho substituents, dia matetika ambany ny asany (anzima vitsivitsy ihany no mampiseho vokatra catalytic tsara kokoa).
Mekanisma katalitika:
| anzima | Kaody vokatra | Kaody vokatra |
| Vovoka anzima | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | andiana amidase 19, 50 mg isaky ny singa 19 * 50mg / singa, na habetsahana hafa |
| Kitapo Fanaraha-maso (SynKit) | ES-AMD-1900 | andiana amidase 19, 1 mg isaky ny singa 19 * 1mg / singa |
★ Fahasamihafan'ny substrate avo lenta.
★ Fifantenana kiral matanjaka.
★ Fahombiazana avo lenta amin'ny fiovam-po.
★ Vitsy kokoa ny vokatra azo avy amin'izany.
★ Toe-javatra misy fihetseham-po malefaka.
★ Sariaka amin'ny tontolo iainana.
➢ Tokony hatao ho an'ny substrates manokana ny sivana anzima noho ny maha-manokana ny substrate, ary hahazoana anzima izay mandrisika ny substrate kendrena miaraka amin'ny fiantraikany katalitika tsara indrindra.
➢ Aza mifandray amin'ny toe-javatra tafahoatra mihitsy toy ny: mari-pana avo, pH avo/ambany ary solvent organika misy fifantohana avo.
➢ Amin'ny ankapobeny, ny rafitra fihetsiketsehana dia tokony ahitana substrate, vahaolana buffer (ny pH tsara indrindra amin'ny fihetsiketsehana anzima). Ny co-substrates toy ny hydroxylamine dia tokony ho hita ao amin'ny rafitra fihetsiketsehana acyl transfer.
➢ Ny AMD no tokony ampiana farany ao amin'ny rafitry ny fihetsiketsehana miaraka amin'ny pH sy ny mari-pana tsara indrindra.
➢ Samy manana ny fepetra tsara indrindra amin'ny fihetsehana ny karazana AMD rehetra, ka tokony hodinihina bebe kokoa tsirairay avy izy ireo.
Ohatra 1(1):
Hetsika hidrolisisa amin'ny substrate amide samihafa
| Substrate | Asa manokana μmols min-1mg-1 | Substrate | Asa manokana μmols min-1mg-1 |
| Asetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
| Propionamide | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| Laktamide | 12.8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
| Butiramid | 11.9 | p-NH2benzamida | 0.8 |
| Isobutyramide | 26.2 | ο-Toluamide | 0.3 |
| Pentanamida | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| Heksanamida | 6.4 | Nikotinamida | 1.7 |
| Sikloheksanamida | 19.5 | Isonicotinamide | 1.8 |
| Akrilamida | 10.2 | Pikolinamida | 2.1 |
| Metakrilamida | 3.5 | 3-Fenylpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3.4 | Indol-3-asetamida | 1.9 |
| Benzamide | 6.8 |
Natao tao anaty vahaolana buffer phosphate sodium 50mM, pH 7.5, tamin'ny 70 ℃ ny fihetsiketsehana.
| Amida | Hidroksilamina | Hidrazina |
| Asetamida | 8.4 | 1.4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramide | 25.0 | 22.7 |
| Benzamide | 9.2 | 6.1 |
Natao tao anaty vahaolana buffer phosphate sodium 50mM, pH 7.5, tamin'ny 70 ℃ ny fihetsiketsehana.
Fifantohana mifandraika amin'izany: amides, 100 mM (benzamide, 10 mM); hydroxylamine sy hydrazine, 400 mM; anzima 0.9 μM.
Ohatra 2(2):
Ohatra 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Biosimia momba ny dingana, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Simia biolojika, 2017, Azo jerena an-tserasera 7.
